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p21、p53及PCNA在人皮肤基底细胞癌和鳞状细胞癌中

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时间:2015-04-17 13:26:23 出处:未知
本文导读:p21、p53及pcna在人皮肤基底细胞癌和鳞状细胞癌中的表达 中华皮肤科杂志1998年第6期第31卷论著摘要 作者:王宏伟王秀丽王椿森 单位:430022武汉,同济医科大学附属协和医院皮肤科[王宏
p21、p53及pcna在人皮肤基底细胞癌和鳞状细胞癌中的表达

中华皮肤科杂志1998年第6期第31卷论著摘要

作者:王宏伟王秀丽王椿森

单位:430022武汉,同济医科大学附属协和医院皮肤科[王宏伟(现在上海市皮肤病性病防治中心)王椿森];湖北医科大学附属第一医院皮肤科(王秀丽)

为了探讨ras基因、p53基因及pcna与基底细胞癌(bcc)和鳞状细胞癌(scc)发生、发展的关系,我们采用链霉亲合素-生物素化过氧化物酶复合物(sabc)连接系统,对10例bcc及10例scc组织中p21、p53及pcna蛋白表达进行了检测。

一、材料与方法

(一)材料:

1.标本:选择1986~1996年保存资料完整的10例bcc和10例scc石蜡包埋组织共20份,均经he染色明确诊断。scc按broders分类法将其分为ⅰ~ⅳ级,其中ⅰ级4例、ⅱ级4例、ⅲ级2例。

2.试剂:鼠抗人广谱p21单克隆抗体、鼠抗人p53单克隆抗体均为美国santacruz公司产品;鼠抗人pcna单克隆抗体为sigma公司产品;sabc试剂盒由武汉博士德生物工程公司提供;防脱片剂apes为sigma公司产品。

(二)免疫组化染色:载玻片先以apes处理,石蜡包埋组织连续作厚4~5μm切片,切片经脱蜡、水化,再以3%h2o2灭活内源性酶、微波修复抗原及正常山羊血清分别处理标本,然后分别滴加p21、p53及pcna单抗。4℃过夜,再滴加生物素化二抗及sabc复合物,以上每一步骤前均以0.1mol/lpbs缓冲液(ph7.4)充分浸洗标本,最后dab显色、苏木素轻度复染、脱水、透明、封片。用已知阳性片作阳性对照,以pbs代替一抗作阴性对照。

(三)判断标准:免疫组化染色阳性为棕黄色,不着色为阴性。p21定位于胞浆及胞膜。p53及pcna定位于细胞核。参照garcia[1]的判断方法确定3种蛋白阳性反应细胞半定量分级:1细胞浅棕黄色着色为1,深棕色为2;2阳性着色细胞比例<20%为1,20%~50%为2,>50%为3。以上两项相加等于2~3为(+),3~4为(),≥4为()。统计学处理采用χ2检验。

二、结果

正常皮肤组织中无p21、p53表达,pcna仅见于表皮基底层细胞,p21、p53及pcna在bcc和scc中的表达情况见附表,其中1例bcc及5例scc同时出现p21、p53及pcna阳性着色。

附表p21、p53及pcna在基底细胞癌和鳞状细胞癌中的表达

病种例数p21染色p53染色pcna染色-+-+-+基底细胞癌10901082000244鳞状细胞癌ⅰ级4211022000310ⅱ级4013011200040ⅲ级2000200020002三、讨论

我们检测10例bcc和10例scc组织中p21蛋白阳性表达率分别为10%和80%,两者之间有显著性差异(p<0.05)。说明bcc和scc存在p21蛋白过度表达,且scc明显多于bcc,这与chesa认为分化好的肿瘤比分化差的肿瘤p21蛋白表达少的观点相一致[2]。在scc不同病理分级中,肿瘤细胞p21着色强度与scc病理分级呈正相关,说明p21着色强度与肿瘤细胞分化程度有关。

本文结果显示bcc和sccp53阳性表达率分别为20%和70%,两者之间有显著性差异(p<0.05)。在scc不同病理分级中,p53蛋白着色强度与分布亦有所不同。随scc病理分级增高,p53蛋白阳性着色强度增强。ⅰ、ⅱ级scc的p53阳性细胞主要分布于癌巢边缘,角化区不出现p53阳性细胞,而2例ⅲ级scc则弥漫分布于肿瘤全层。提示突变型p53蛋白表达强度及分布部位可能与scc的恶性程度有关。pcna是一种仅在增殖细胞中合成的多肽,可较准确地反映细胞所处增殖状态[3]。本文中bcc和scc均全部出现pcna阳性着色,两者之间无显著性差异,提示bcc和scc均存在肿瘤细胞的增殖,而bcc是一种恶性度低、很少发生转移的肿瘤,故认为pcna只能反映细胞增殖状态和所处周期,而不能反映出细胞增殖的性质,用pcna单一指标判断肿瘤的恶性程度及预后是不妥的。

参考文献

1garciarl.coltreramd,gownam.analysisofproliferativegradeusingantipcna/cyclinmonoclonalantibodiesinfixed,embeddedtissues:comparisonwithflowcytometricanalysis.amjpathol,1989,134∶733-739.

2chesapg,rettigwj,melamedmr,etal.expressionofp21rasinnormalandmalignanthumantissues:lackofassociationwithproliferationandmalignancy.procnatlacadsciusa,1987,84∶3234-3238.

3yuccw,fletchercdm,newmanpl,etal.acomparisonofpcnaimmunostaining,agnorstaining,andhistologicalgradingingastrointestinalstromaltumours.jpathol,1992,166∶147-152.

(收稿:1997-09-22修回:1998-01-26)

责任编辑:屈屈 关键词:细胞 阳性 着色 肿瘤 表达

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